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生物顯微鏡微生物污染的檢測

更新時間:2012-08-27   點擊次數(shù):2529次

生物顯微鏡微生物污染的檢測

污染的潛在來源是多方面的,如來自用具、室內空氣、工作臺面、組織樣品v溶液,以及操作過程等。因此必須盡量小心地去避免它。然而,即使是zui的實驗室,也準免不發(fā)生污染。因此。要經(jīng)常進行檢測,爭取盡早發(fā)現(xiàn),及時排除,防止擴大污染。

建議采用如下步驟檢測:

(1)用肉眼或生物顯微鏡檢查各步驟的污染。每2—3個月核查一次支原體(如果是原代培養(yǎng),則2—3周核查一次)。

(2)如懷疑有污染,但仍不明顯,又沒有證明,除懷疑的培養(yǎng)物和吸管外,先將工作罩子和工作臺面清潔消毒。然后,待所有的培養(yǎng)工作操作步驟結束后,取懷疑培養(yǎng)物樣品.摘在載敢片上,在生物顯微鏡下仔細檢查,用位相差顯微鏡進行檢查。如證明有污染,將吸管丟棄,用70%酒精按沈罩子和工作臺面,30分鐘后再使用。

(3)將污染性質記錄在登記卡上。

(4)如果是新的污染,又是局部污染,沒有擴散,則將污染培養(yǎng)物、用來接種污染培養(yǎng)物的培養(yǎng)瓶和其他用于此培養(yǎng)的胰蛋白酶瓶子等丟棄到消毒劑中去,在組織培養(yǎng)區(qū)外的毒氣罩內操作。

(5)如果是新的污染,而且是散播的,即至少在兩個不同培養(yǎng)物中均發(fā)現(xiàn)有的,應把所有的培養(yǎng)液、母液以及胰蛋白酶等均丟棄。

(6)如果類似污染重復出現(xiàn).則檢測母核是否污染??刹捎玫臋z測法:1)單獨濕育或在營養(yǎng)肉湯中溫育;2)鋪在營養(yǎng)瓊脂板(Difco)上;3)假如上述兩個方法均末檢測出來,但仍有懷疑時,則取100m1,通過0.2μm濾膜過濾,然后將濾膜鋪在營養(yǎng)瓊脂上溫育。

(7)如果污染不但廣泛散播,又是多品種的,而且重復再現(xiàn),則需要檢查消毒步驟,即烘箱和蒸氣消毒鍋的溫度、消毒時間、包裝和貯存方面是否有問題.以及房間消毒和超凈

工作臺的垂直層流的過濾器是否失效。

(8)不要企圖清除污染物的污染,除非它們是*的培養(yǎng)物。清除污染可以:1)用

合有比正常濃度高的抗生素的B5s清洗培養(yǎng)物,清洗5次;2)加抗生素到培養(yǎng)液中,放置48小時。如果可能,可檢測污染物對四一種抗生累比較敏感53)除去抗生素。在不加抗生素情況下培養(yǎng)2周,核查污染是否已被清除。

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