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徠卡體視顯微鏡中分辨力和Z小分辨距離

更新時(shí)間:2013-09-04   點(diǎn)擊次數(shù):1910次

徠卡體視顯微鏡中分辨力和zui小分辨距離

徠卡體視顯微鏡中的分辨力是指分辨被撿物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的能力,也就是分辨兩個(gè)物點(diǎn)之間zui短距離隊(duì)能力,顯微鏡的分辨力主要出物鏡的分辨力所決定。表示一個(gè)物鑰分辨力大小的參數(shù)是zui小分辨距離,它是指物鏡可以分辨的兩個(gè)物點(diǎn)之間的zui小距離。因此一個(gè)高的分辨力意味著一個(gè)小的可分辨距離,這兩個(gè)因素是成反比關(guān)系的,然而有些人往往把分辨力說(shuō)成是多少Pm或人,這實(shí)際上是把分辨力和zui小分辨距離混淆起來(lái)了。

根據(jù)波動(dòng)光學(xué)原理,對(duì)于兩個(gè)在黑暗背景上的自發(fā)光點(diǎn),如果它們相應(yīng)的衍射盤(pán)靠的不是太近,它們將會(huì)被分辯。

徠卡體視顯微鏡中中的情況實(shí)際上要更加復(fù)雜。除了非常特殊的情況而外,顯微鏡標(biāo)本并不是自發(fā)光體,它的光來(lái)源于光源。物體的不同部分可以從光源的同一點(diǎn)接受光線,這種光源稱為相干性光源,光波是能夠于涉的。由于這種于涉作用,zui小分辨距離將會(huì)適當(dāng)?shù)卦龃?,根?jù)計(jì)算增大1.63倍左右。這樣,在相干照明條件下zui小分辨距離6為:

實(shí)際上這種情況可以歸納為zui小分辨距離,這相當(dāng)于集光器的孔徑從。到與物鏡孔徑相同的數(shù)值之間。在表3中列出了當(dāng)波長(zhǎng)k=550nm(綠光)時(shí)的一些常用孔徑物目的8值。然而這些數(shù)值仍然是理論值,在理論值和實(shí)際的6值之間存在著明顯的差別。在具有低反差的厚切片上這個(gè)理論值是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不會(huì)達(dá)到的,只有當(dāng)物體切片的厚度不大于zui小分辨距離的lo倍,并且具有足夠程度的反差時(shí),這種zui小分辨距離才會(huì)達(dá)到??磥?lái)反差對(duì)于接近或低于zui小分辨距離的物體是非常重要的,由于缺乏一定程度的反差,應(yīng)該很容易被分辨的物體并不一定被看清楚。

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